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GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)

發(fā)布時(shí)間: 2022-02-23

《GB 29921-2021預(yù)包裝食品中致病菌限量》于2021年11月22日實(shí)施,其中,肉制品和即食果蔬制品中致病菌指標(biāo)變化較大,刪除了大腸埃希氏菌O157:H7/NM,新增加了致瀉大腸埃希氏菌項(xiàng)目,引起了廣大檢驗(yàn)同行的關(guān)注!

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)


對(duì)于沒(méi)接觸過(guò)這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的小伙伴們來(lái)說(shuō),致瀉大腸埃希氏菌聽(tīng)起來(lái)比較陌生,那就跟隨小編來(lái)一起了解下這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)吧!


致瀉大腸埃希氏菌簡(jiǎn)介


致瀉大腸埃希氏菌(Diarrheogenic?E. coli,DEC),是一類能引起人體以腹瀉癥狀為主的大腸埃希氏菌,可經(jīng)過(guò)污染食物引起人類發(fā)病。常見(jiàn)的致瀉大腸埃希氏菌主要包括腸道致病性大腸埃希氏菌EPEC、腸道侵襲性大腸埃希氏菌EIEC、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌ETEC、產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌STEC(包括腸道出血性大腸埃希氏菌EHEC)和腸道集聚性大腸埃希氏菌EAEC。


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)


致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)程序

GB4789.6-2016


選擇性增菌


樣品經(jīng)營(yíng)養(yǎng)肉湯增菌后轉(zhuǎn)接到腸道菌增菌肉湯中。

? 注意

1、營(yíng)養(yǎng)肉湯增菌時(shí)間為6h,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)增加非目標(biāo)菌的數(shù)量;


2、腸道菌增菌肉湯的培養(yǎng)溫度為42℃,有助于抑制非腸道菌生長(zhǎng)。


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)

五種致瀉大腸埃希氏菌及大腸埃希氏菌在腸道菌增菌肉湯中生長(zhǎng)情況



選擇性分離



將增菌液劃線接種MAC和EMB瓊脂平板,于36℃ ± 1℃培養(yǎng)18h~24h,觀察菌落特征:

在MAC瓊脂平板上,分解乳糖的典型菌落為磚紅色至桃紅色,不分解乳糖的菌落為無(wú)色或淡粉色;

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)


在EMB瓊脂平板上,分解乳糖的典型菌落為中心紫黑色帶或不帶金屬光澤,不分解乳糖的菌落為無(wú)色或淡粉色。

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)






生化鑒定




GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)

GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)

DBI-09?致瀉大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒



五種致瀉大腸埃希氏菌與大腸埃希氏菌生化反應(yīng)一致,無(wú)法區(qū)分,需要通過(guò)PCR進(jìn)行進(jìn)一步確認(rèn)。


PCR確認(rèn)實(shí)驗(yàn)


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)

MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測(cè)試劑盒

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陸橋五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測(cè)試劑盒操作流程示意圖




GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)

五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測(cè)瓊脂糖凝膠電泳


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)

五種致瀉大腸埃希氏菌目標(biāo)條帶與型別對(duì)照表(GB4789.6-2016



根據(jù)瓊脂糖凝膠電泳中樣品DNA的擴(kuò)增條帶大小,與GB 4789.6-2016中表5(如上)進(jìn)行對(duì)照,作為最終的結(jié)果進(jìn)行報(bào)告。每次PCR反應(yīng)使用 EPEC、EIEC、ETEC、EHEC、EAEC標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陽(yáng)性對(duì)照。




MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測(cè)試劑盒


北京陸橋的五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測(cè)試劑盒采用多重PCR技術(shù),適用于五種致瀉大腸埃希氏菌的體外核酸檢測(cè):

01

每個(gè)反應(yīng)體系均含有大腸埃希氏菌種屬鑒定和毒力基因檢測(cè)的十二對(duì)特異性引物,一次反應(yīng)即能鑒定五種致瀉大腸埃希氏菌的型別;

02

采用國(guó)際先進(jìn)的預(yù)混凍干技術(shù),既簡(jiǎn)化了操作(兩步即可上機(jī)),又能使產(chǎn)品可以常溫或冷藏運(yùn)輸,且保持Taq酶較高的酶活性,極大的方便了客戶的檢測(cè)工作。



檢驗(yàn)產(chǎn)品列表


GB4789.6-2016 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)及注意事項(xiàng)

相關(guān)產(chǎn)品詳情可點(diǎn)擊以下查詢:


CM142?營(yíng)養(yǎng)肉湯(不含糖)


CM144?腸道菌增菌肉湯(EE)


CM908B?麥康凱瓊脂?


CM105?伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)


DBI-09?致瀉大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒?


MX-2101?五種致瀉大腸埃希氏菌多重PCR檢測(cè)試劑盒?




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